□ 水产专家 夏艳洁

我省鱼类细菌性疾病如肠炎病、赤皮病、烂鳃病等，时有发生，而疫苗是疾病预防的最好方法，本文介绍鱼类土法疫苗的制备方法。

材料、用具及药品

病鱼、解剖盘、大小镊子，大小剪刀、三角烧瓶（50ml）、漏斗、研钵、量筒、天平、恒温水浴锅、纱布、碘酒或酒精、生理盐水、福尔马林、蒸馏水。

方法步骤

1、活苗制备：

取材：发病时节，取有典型病状的草鱼（赤皮病、烂鳃病、肠炎病），用碘酒或酒精消毒鱼腹（其用具全剖消毒），再用消毒镊子取出肝、脾、肾等适当部位。

称重：将取出的部位称重。

稀释：称重后，放入消毒过的研钵中磨离碎成糊状，加入5倍的生理盐水。

过滤：将加入生理盐水后的组织浆用二层纱布过滤，弃去滤渣。滤液为活苗。量筒量好放入三角烧瓶中。

2、灭活：将活苗放入水浴锅内加温保持60-65℃两小时。

3、防腐保存：取已灭活的疫苗加入福尔马林（市售40%，看作100%），成1%浓度，然后石蜡封瓶口放入冰箱内保存（2-3个月）或荫凉处保存1.5个月，久置影响疫苗的作用。

注意事项

疫苗的优劣，与取材有关，必须选用典型传染性病鱼。

水浴加温，60-65℃两小时。加热不足，去毒不安全，会造成人工感染。温度太高，会破坏疫苗的抗原性。

福尔马林选用化学试剂，避免农药福尔马林代替所造成杂质引起副作用。

全部用具要煮沸消毒。

制备疫苗要精心，以防疫苗中含有的大颗粒注入体后不能快速吸收而造成局部炎症及坏死。

疫苗量需要大时，可用活苗背鳍基部注射鳙鱼或草鱼，即扩大感染，经2-4天，可获得具免疫力的疫苗。

活苗保存：50%蔗糖牛奶作保护剂，以1∶2充分混合后装入毒种小瓶（25ml），每瓶3ml，置真空冷冻干燥机（真空度40-20微米汞柱，-40℃）冻干15-16小时，取出后，加塞封口，无菌操作，放入冰箱2-5℃，保存一年半以上。